محیط کشت فلچر پایه

فلچر پایه:

یک محیط غنی شده و نیمه جامد است که برای کشت لپتوسپیرا از آن استفاده می شود

فلچر یک محیط غنی شده برای کشت لپتوسپیرا از نمونه های بالینی مانند ادرار، خون، کلیه و بافت های کبد می باشد.

لپتوسپیرا شامل هر دو شکل زندگی آزاد و انگل است. گونه های بیماری زا Leptospira interrogans نامیده می شوند. این موجودات بسیار کوچکتر از آن هستند که بتوان آنها را در فرآورده های مرطوب ساخته شده از خون تازه مشاهده کرد. مطمئن ترین روش برای آزمایشگاه تشخیص لپتوسپیروز کشت ارگانیسم از خون یا مایع مغزی نخاعی در هفته اول بیماری یا از ادرار پس از آن برای چند ماه قابل استفاده است چند قطره خون ضد انعقاد هپارینه شده یا کلرید سدیم تلقیح می شود فلچرز متوسط. پایه متوسط ​​فلچر لپتوسپیرا طبق فرمولاسیون فلچر  تهیه شده و برای جداسازی لپتوسپیرا از نمونه های خون، ادرار و کلیه استفاده می شود تمامی کشت ها تا 6 هفته در دمای اتاق در تاریکی انکوبه می شوند. ارگانیسم ها در زیر سطح رشد می کنند متوسط. مواد جمع‌آوری‌شده از چند سانتی‌متر زیر سطح کشت‌های آبگوشت باید به‌صورت هفتگی برای بررسی آن مورد بررسی قرار گیرند حضور رشد با استفاده از یک آماده سازی مستقیم مرطوب تحت نور در میان تاریکی محیط بررسی می گردد لپتوسپیرها دارای حرکاتی شبیه به پیچ چوب پنبه ای هستند. این محیط حاوی هضم پپتیک بافت های حیوانی و عصاره گوشت گاو است که مواد مغذی لازم را برای رشد باکتری کلرید سدیم یون های ضروری را فراهم می کند. مکمل غنی سازی کربن، ویتامین ها و انرژی را فراهم می کند منابع مورد نیاز برای رشد لپتوسپیرا غلظت کم آگار به تشخیص تحرک کمک می کند. پایه متوسط ​​لپتوسپیرا با افزودن سرم خرگوش غنی شده است. سرم خرگوش حاوی هموگلوبین بومی است که همراه  با تیامین به رشد لپتوسپیرال کمک می کند. لوله ها را از نظر رشد هر 5-7 روز بررسی کنید. رشد به صورت ناحیه حلقه ای رخ می دهد (دیسک) 1-3 سانتی متر زیر سطح محیط. فقدان ناحیه رشد حلقه ای لزوماً به این معنی نیست که لپتوسپیرها وجود دارند . مقدار کمی از رشد را از ناحیه دیسک بردارید و به صورت میکروسکوپی بررسی کنید . میکروکلونی ها را می توان با متانول تثبیت کرد و با رنگ گیمسا رنگ آمیزی کرد تا شکل میله ای را نشان دهد.